基因工程的基本操作程序绪论(PPT 61页)

1、目的基因概念：
主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的因子。
2、目的基因获取方法：
Ⅰ、从基因文库中获取目的基因
Ⅱ、利用PCR技术扩增目的基因
Ⅲ、化学方法直接人工合成
基因文库的构建过程
将含有某种生物不同基因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,
各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
PCR的全称：
聚合酶链式反应
PCR的原理：
DNA复制
PCR技术扩增目的基因的前提条件：
要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。
利用PCR技术扩增目的基因
启动子的作用：
1、什么是转化？
2、目的基因导入植物细胞常用的方法是什么？具体过程是怎样的？
3、目的基因导入动物细胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎样的？
4、目的基因导入大肠杆菌的方法是怎样的？钙离子有什么作用？
1、导入目的基因后需要检测哪些方面？各采取什么方法？
2、什么是DNA分子探针？检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA？
3、利用抗体－抗原杂交检测的原理是什么？
归纳:基因工程的基本操作程序
获取目的基因
从基因文库
利用PCR
化学方法人工合成
构建基因表达载体
目的基因、启动子、终止子、标记基因
将目的基因导入受体细胞
农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理
目的基因的检测与鉴定
检测：是否插入、转录、翻译
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