胶体金生产工艺配方原则概述(PPT 80页)

硝酸纤维膜生产工艺图
孔径定义的问题
孔径对侧向层析速度的影响
不同种类膜的IgG结合能力
不同种类膜的BSA结合能力
为什么蛋白会结合到膜上?
结合力是什么?
静电
疏水力
这两种结合力的效应是什么?
使蛋白从溶液中分离出来
长久结合作用
静电作用力
静电作用力是正负电荷相互吸引产生的作用力
疏水作用力
疏水作用力又称为疏水键。
它是由侧链的疏水基团相互接近.而形成的一种作用力。
对维持分子的三、四级结构起着重要的作用。
每一个蛋白质都具有疏水基团和亲水基团。
蛋白质疏水性状和亲水性状
当蛋白质溶解在溶剂中时，蛋白质处于非常稳定的状态，
此时蛋白质的亲水基团展开在外，疏水基团收缩在内，
亲水基团和水分子接触，保证了溶解性的状态；
当蛋白质沉淀出来时，疏水基团展开，亲水基团收缩，
此时为疏水状态，也呈现不稳定的固体状态，
疏水基团和其他固体物的疏水基团通过疏水作用力结合，
达到固定的目的。
蛋白结合到固相材料上
蛋白结合到固相材料上是一个多步骤过程
取决于
蛋白溶液扩散到固相表面
蛋白从溶液中分离出来
蛋白吸附到固相上
蛋白重排到最低能态
吸附过程
多位点结合
影响蛋白结合的因素
蛋白缓冲液
使用的膜
蛋白自身
应用体系
没有通用的缓冲液，不同的系统必须分别优化。
作用：提供适合的PH,改善亲水性,增溶性,提高稳定性
定律:
“蛋白在缓冲液中越不稳定，蛋白结合力越强”
缓冲液的优化
离子强度
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