干扰素制备的工艺流程图教材(PPT 28页)

干扰素的制备流程
干扰素
什么是干扰素?
概念(interferon,IFN):机体免疫细胞产生的一类细胞因子,是机体受到病毒感染时
,免疫细胞通过抗病毒应答反应而产生的一组结构类似、功能接近的生物调节蛋白。
根据分子结构和抗原性的差异分为α、β、γ、ω等4个类型。
α干扰素又依其结构分为α1b、α2a、α2b等亚型
其区别在于个别氨基酸的差异上,早期干扰素是用病毒诱导人白血球产生的,产量低、
价格昂贵,不能满足需要，,现在可利用基因工程技术并在大肠杆菌中发酵、表达来进行生产。
3、碱裂解法
1）将洗过的500ml培养物的细菌沉淀物[来自收获细菌的步骤3]重悬于10ml(18ml)溶液Ⅰ中。
溶液Ⅰ：50mmol/L葡萄糖25mmol/LTris.Cl(Ph8.0)
10mmol/LEDTA(Ph8.0)
溶液Ⅰ可分批配制，在101bf/in2(6.895x104Pa)高压下蒸汽灭菌15分钟，贮存于4℃。
2）加1ml(2ml)新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml,溶于10mmol/LTris.Cl(Ph8.0)]。
当溶液的pH值低于8.0时，溶菌酶不能有效工作。
3）加20ml(40ml)新配制的溶液Ⅱ。
溶液Ⅱ：0.2molLNaOH(临用前用10molL贮存液现用现稀释)1%SDS
盖紧瓶盖，缓缓颠倒离心瓶数次，以充分混匀内容物。于室温放置5-10分钟。
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