临床生化检验应用工程师基础知识培训(doc 33页)

主要内容
一、生化基础知识
二、生化仪器基础知识
三、部分生化项目的临床意义

 

 

内容摘要
一、 生化基础知识
1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。
1.2生化诊断试剂用于检测样本，包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物，用于预测，诊断以及治疗监测，协助临床医生诊治疾病提供数据参考。
1.3按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。
1.4试剂性能评价指标：
1 试剂外观
2批间差
3准确度
4精密度
5线性（灵敏度）
6抗干扰能力（特异性）
7稳定性
1.5试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc
 式中，A 为吸光度;K 为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数 ;b为液层厚度，单位为cm;c 为吸收物质的浓度。当浓度的单位为 mol/L时，K 的单位为L/mol•cm，称为摩尔吸收系数，通常用ε 表示。摩尔吸收系数ε 表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。ε愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强，因而分光光度法测定的灵敏度就愈高.
1.6理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。
偏离 Lambert-Beer定律的因素：
1复合光对Beer 定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计，即使高精度的仪器，也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离Lambert Beer 定律。
2 杂散光的影响：杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。
3狭缝宽度的影响：单色器设有进、出口狭缝，狭缝愈窄，单色光愈纯，吸光度增加，但辐射能减小，对弱吸收带的测量有一定影响。定性分析时，为提高分辨能力常采用较小的狭缝，而定量分析时，在灵敏度允许的情况下，宜采用较大狭缝。当出、入射狭缝宽度相等时，狭缝宽度引起的误差最小。
4非吸收作用引起的误差：
1.散射效应：光吸收定律只适用于均匀的吸收体系，如待测溶液是混浊的，当光通过时，将产生散射效应。其结果使光通过吸收物质的光程不固定，散射光的一部分和透射光一起进入检测器，导致偏离 Beer 定律。因此，免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。

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