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液相色谱培训资料(PPT 69页)

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企业培训
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液相色谱,培训资料
液相色谱培训资料(PPT 69页)内容简介
液相色谱按两相极性不同分为:
正相色谱
反相色谱
化合物保留时间随流动相配比的变化
不同极性的化合物出峰顺序
流动相
流动相选择注意事项:
纯度:采用“HPLC”级溶剂
避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂
对试样有适宜的溶解度
溶剂粘度要小
与检测器相匹配
流动相配制时的顺序
HPLC用水可以通过以下几个方面来得到:
1专门的纯水机或超纯水机;
2去离子水重蒸;
3二次或三次重蒸水;
4采用类似家用的纯水机;
5市场上瓶装的纯净水或蒸馏水;
6其它途径;
不管采用何种途径,
配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。
理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水,
并通过0.22um的滤膜,除去热源、有机物、无机离子及空气等。
溶剂前处理
过滤:0.45um或更小孔径滤膜
目的:除去溶剂中的微小颗粒,
避免堵塞色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液。
脱气
目的:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡
一般混合溶剂中能容纳的空气量往往
要比单个溶剂所能容纳的空气总量要小
气泡对测定的影响:
1)柱压波动,流量偏小
2)基线波动
岛津VP系列输液泵
进样器
自动进样器
手动进样器
原理:(六通阀)
注入方式:
1)全量注入
2)部分注入
HPLC六通阀进样器的使用及保养
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液相色谱培训资料(PPT 69页)