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DNA重组技术的基本工具概述(PPT 43页)

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并购重组
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DNA重组技术的基本工具概述(PPT 43页)内容简介
问题探讨:
 苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。
 让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达,可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。
想一想需要做哪些关键工作?
现在已经从约300种微生物中分离出约4000种限制性内切酶(限制酶)。
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
⑴有1~多个限制酶切点
⑵对受体细胞无害
⑶使导入基因能在受体细胞中复制、表达
⑷有某些标记基因,便于筛选
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有▲个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越▲。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是▲。
(4)与只使用EcoRI相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止▲。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入▲酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了▲。
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