基因重组与基因工程技术课件(PPT 107页)

重组DNA技术--基因重组与基因工程
DNA重组的基本模式
(分)------目的基因及载体的分离
化学合成法
从基因文库中筛选
从mRNA反转录合成cDNA
聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）
载体DNA的选择
质粒载体的一般结构
切------限制性内切酶酶切
载体和目的基因的切断
（二）人工接尾法：
（三）人工接头连接法：
转------重组体的转化
宿主菌或受体细胞
感受态细胞（competent  cell）
大肠杆菌感受态细胞的制备( 化学方法)
真核细胞的转染
重组体克隆的筛选与鉴定
阳性重组子的筛选与鉴定
遗传检测法(根据重组载体的标志作筛选)
限制性酶切法
PCR法
杂交筛选法
免疫学方 法
核苷酸序列测定法
遗传检测法
免疫化学检测法
DNA序列分析法
真核细胞的筛选
外源基因在宿主细胞中的表达
原核生物基因结构和表达特点
影响外源基因在原核细胞中表达效率的因素：
真核基因结构及表达调控特点
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