您现在的位置: 精品资料网 >> 行业分类 >> 建筑工程管理 >> 工程管理 >> 资料信息

基因工程技术概述(ppt 51页)

所属分类:
工程管理
文件大小:
2408 KB
下载地址:
相关资料:
基因工程技术
基因工程技术概述(ppt 51页)内容简介
主要内容
基因工程技术
定义:
应用:
基因工程基本步骤:
基因工程流程示意图
构建重组分子(连接)
目的基因片段来源:
目的基因来源选择:
PCR:
片断的回收与纯化
载体:
穿梭载体(shuttIe vector)
质粒载体
克隆载体: PBR322
TA 克隆
TOPO-TA
表达载体:带有调控基因表达所必需的转录与翻译元件,如启                                           动子等,这些调控元件应与宿主细胞相适应。
真核表达载体:大多是穿梭载体。
pFLAG-CMV系列(Sigma)
Tet-On/Tet-Off Expression Systems
DNA分子的体外连接:方法
两种情况:
碱性磷酸酶处理:
平头末端:
其他方法:
连接策略:
选择连接位点:
连接浓度:
连接反应:
连接酶:两种
其他酶:末端修饰酶
重组子导入受体细胞:
重组子导入受体细胞:途径
转化
感受态菌制备
氯化钙法:原理
重组子的筛选:
插入失活:
α互补现象:蓝白斑筛选
Protocol:
阳性克隆的鉴定:
碱裂解法
试剂作用:
初步鉴定
后续:

..............................