DNA重组之目的基因的分离（ppt 63页）

DNA重组之目的基因的分离目录：
一、目的基因的功能克隆
二、序列克隆法
三、差别杂交法
四、减法杂交技术
五、mRNA差别显示技术

 

DNA重组之目的基因的分离内容提要：
目的基因的功能克隆：
根据蛋白质的基本生化特性这一功能信息，在获知基因的功能后克隆
其具体作法是:在纯化相应的编码蛋白后构建cDNA文库或基因组文库，然后从文库中筛选目的基因
(1)将纯化的蛋白质进行氨基酸测序，据此合成寡核苷酸探针从cDNA库或基因组文库中筛选编码基因
(2)将相应的编码蛋白制成相应抗体探针，从cDNA表达文库中筛选相应克隆。
差别杂交法：
适用范围：
组织特异性表达或特定发育阶段表达的基因
某受生长因子调节的基因
某经特殊处理诱导表达的基因
应用前提：基因在两种不同的细胞群体中的差异性表达（一个细胞群体中正常表达，另一个细胞群体中目的基因不表达）。

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