酶工程之固定化酶(PPT 87页)

第三章固定化酶
一.什么是固定化酶？
二.固定化酶发展史
三.固定化酶的优点
四.固定化酶的缺点
第二节固定化酶的性质及其影响因素
1.固定化对酶反应体系的影响
2.固定化酶性质的变化
举例：热稳定性提高
最适pH的变化
对蛋白酶抗性提高
固定化酶Km的变化随载体性质的变化
2.固定化后酶稳定性提高的原因
3.评价固定化酶的指标：
4.固定化酶活力测定方法—间歇测定
第三节固定化酶的制备
一．固定化方法简介
一．固定化方法简介—选择依据
一．固定化方法简介—品质检测
二．酶的固定化方法
常用载体：
（二）结合法
离子键结合法：
酶蛋白上可供载体结合的功能基团：
常用载体及载体上常用的基团：
反应要求：
共价键结合法制备固定化酶的“通式”
载体活化方法：
A．重氮法
B．叠氮法
C．烷基化反应法
D．硅烷化法
E．溴化氰法
溴化氰亚氨碳酸基偶联法
（三）交联法
（三）交联法常用试剂
（三）交联法的形式
1.酶直接交联法
2.酶辅助蛋白交联
3.吸附交联法
4.交联包埋法
（四）包埋法
1．网格型包埋法
1．网格型包埋法常用载体
2．微囊型包埋法
①界面沉淀法
②界面聚合法
固定化酶方法研究热点
各类固定化方法的特点比较
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