荧光定量PCR数据处理方法探讨(pdf 6页)

荧光定量PCR数据处理方法探讨内容提要：
自1983年bltillis构思了PeR(耐岫_lera篇el咂in麟蒯饥)技术，1985年美国Science杂志酋刊Saikiul等使用PCR方法做出镰状细胞贫血基因诊断以来，PCR技术已成为生命科学极有用的研究工具。随着荧光在PeR中的应用以及检测技术的发展，PE公司发现了利用荧光标记的探针在P(m循环过程中积累的荧光强度达到仪器检测阈值时，系统的初始模板数量与循环次数之间有线性关系，从此建立了目前的定量PeR技术。实时定量PcR是检测基因最灵敏的方法，特别是低丰度的基因b。J，比N0m啪印迹、斑点印迹、竞争P(R、半定量PeR具有准确、敏感、简便、污染率低等特点，在微生物的检测、食品的检测、病原体的检测、药物疗效考核、转基因研究以及基因表达研究等方面有重要的应用价值。
实时定量PcR的数据分析方法有两种：绝对定量和相对定量怕“J。绝对定量一般通过标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数，相对定量方法则是比较处理过的样品和未处理过的样品目的基因转录本之间的表达差异。而相对定量又有双标准曲线法、2。厶6Q法以及动力学法峥。
..............................