葡萄酒中苹果酸的测定(doc 16页)
葡萄酒中苹果酸的测定(doc 16页)内容简介
原理:
利用MegaQuantTM (专利技术)测定L-苹果酸需要进行三步酶解反应,第一步:在L-苹果酸脱氢酶(L-MDH)的催化作用下,L-苹果酸被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)氧化生成草酰乙酸:
(1) L-苹果酸 + NAD+ (L-MDH) oxaloacetate + NADH + H+
第二步:加入过剩的L-谷氨酸,在谷草转氨酶的作用下,生成L-天门冬氨酸和2–酮戊二酸
(2) Oxaloacetate + L-glutamate (GOT) L-aspartate + 2-oxoglutarate
第三步:在心肌黄酶的催化作用下,NADH还原碘硝基氯化四氮唑(INT),生成甲基- INT
(3) NADH + INT + H+ (diaphorase) NAD+ +甲基-INT
生成的甲基- INT的量取决于L-苹果酸的量,甲基- INT的吸光度值可在505nm下测量。
特异性, 灵敏度, 测量范围和精确度:
该实验方法是专门用于测定L-苹果酸含量的。
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